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激光掃描共聚焦顯微鏡可測定的樣品種類很多．包括生物材料、組織(切片)、細胞(亞細胞)結構等。樣品中熒光的來源主要有如下幾種：自發熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、誘發熒光(inducedfluorescence)及酶致熒光(enzymaticallyproducedfluorescence)等等。其中大部分熒光素的激發和發射波長均可在儀器自帶軟件的染料信息庫中找到。1．觀察步驟及儀器操作根據實驗要求制備樣品完畢后。即可進行觀察。基本步驟如...

人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉移模型的建立：（1）探討肺癌遠處轉移和阻斷其遠處轉移的研究；（2）模擬晚期非小細胞肺癌轉移的自然發生過程；（3）在活體動物的完整器官內評估瘤細胞播散和腫瘤的生長。實驗方法原理將表達GFP的質粒pRNAT-U6/Neo轉染人肺腺癌細胞A549，G418篩選獲得穩定表達GFP細胞，對比轉染前后細胞的生長活性和成瘤性。將轉染后細胞原位種植裸鼠預定標準處死。HE染色和免疫組化檢測轉移灶的位置和數目。利用KODAKIS2000MM系統檢測腫瘤播散情況。實驗材...

人胃癌高轉移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉移機制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉移研究提供更為理想的動物模型。腫瘤組織塊原位移植法實驗方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴結和肝臟等器官轉移，轉移率達66.7%(2/3)，第6周末轉移率高達*(10/10)。實驗材料雄性SPF級SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901試劑、試劑盒水合氯醛福爾馬林液儀器、耗材飼養籠光學顯微鏡石蠟實驗步驟一、實驗材料準備1.雄性SPF級SCID小鼠，...

人胰腺癌裸小鼠模型實驗方法原理將人胰腺癌細胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE染色。實驗材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌細胞株8988試劑、試劑盒RPMI-1640*培養基胰酶戊二醛儀器、耗材CO2培養箱試管實驗步驟一、實驗材料準備裸小鼠BALB/cnu-nu，4～6周齡，體重16～20g，雌雄兼備，SPF級環境中飼養，恒溫25～27℃，恒濕45...

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發現Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數需要.如果需要提高PCR產物的特異性，應該使用熱啟動聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，應該在PCR反應混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板，選擇的STR標記的大小應該是78~250bp,因為這些DNA模板...

免疫熒光方法中的重要環節:1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內部結構破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰丙酮等固定液進行固定5-10min，尤其要較長時間保存的白片，一定要及時固定和適當保存。3、血清封閉：為防止內源性非特異性蛋白抗原的結合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調整的，一般10-30min。4、一抗孵育條件：在免疫組化反...

免疫熒光標記技術（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PBS抗體儀器、耗材玻片加濕盒實驗步驟1.將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。2.待載玻片達室濕且未干...